当天然的RNase在8mol/L尿素存在下,用β-巯基乙醇处理后,分子内的四对二硫键即被还原成为巯基,整个肽链伸展而变成无规卷曲,同时酶的活性完全丧失。但是,当用透析方法将尿素和巯基乙醇除去后,RNase活性又逐渐恢复。 这一实验的结果说明了蛋白质的三级结构是由一级结构所决定的。
问答题要测定蛋白质的二硫键位置,需用什么方法?请简述之。
问答题用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原?如果要打开牛胰岛素核酸酶链内的二硫键,则在反应体系中还必须加入什么试剂?蛋白质变性时,为防止生成的-SH基重新被氧化,可加入什么试剂来保护?
问答题举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺序?
问答题蛋白质变性过程中,有哪些现象出现?并举出三种能引起蛋白质变性的试剂。
问答题大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质,为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性,常有很大困难。但为了某种目的,请根据下列要求写出具体的方法。 ⑴利用溶解度差别进行分离。 ⑵利用蛋白质分子大小进行分离。 ⑶根据不同电荷进行分离。 ⑷以制备有该产物的抗体进行分离。 ⑸产物的浓缩。 ⑹纯度的鉴定。