将目的基因克隆到带有SP6或T7启动子的质粒中,插入到启动子下游。再用适当的限制酶在插入序列的下游切断质粒使环状质粒DNA 变为线性DNA,加入RNA 聚合酶、4种NTP,其中一种为α-32P 标记的NTP 。以目的基因的DNA 为模板,体外转录出高放射性活性的RNA 探针。
问答题试述寡核苷酸探针的制备。
单项选择题引物3’端最佳碱基选择是:()。
A.A 和TB.G 和AC.G 和CD.A 和C
单项选择题可以采用以下哪种方法,协助诊断是否存在基因的突变或者缺失:()。
A.原位PCRB.多重PCRC.不对称PCRD.锚定PCR
多项选择题以下关于PCR 技术应用,说法正确的是:()。
A.筑巢PCR 和共享引物PCR 有利于增强PCR 反应的特异性,适用于模板含量极少的样品的检测B.不对称PCR 可以大量制备单链DNA ,可用于DNA 的序列测定C.反向PCR 和锚定PCR 适用于3’或5’端未知序列的DNA 片段扩增D.定量PCR 可用于基因表达和调控的研究
多项选择题PCR 反应时,应设立哪种对照:()。
A.阴性对照B.阳性对照C.试剂对照D.以上答案都正确