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问答题

简答题 试述cDNA 探针的制备。

【参考答案】

cDNA 中由于不存在内含子及其他高度重复序列,因此是一种较为理想的核酸探针。以mRNA 为模板,在逆转录酶催化下,逆转录获得cDNA 后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA 得到大量扩增。制备质粒后,用限制酶切割重组质粒,将cDNA 片段切割下来,分离纯化,即可作为探针使用。