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问答题

简答题

大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质,为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性,常有很大困难。但为了某种目的,请根据下列要求写出具体的方法。
⑴利用溶解度差别进行分离。
⑵利用蛋白质分子大小进行分离。
⑶根据不同电荷进行分离。
⑷以制备有该产物的抗体进行分离。
⑸产物的浓缩。
⑹纯度的鉴定。

【参考答案】

首先要有一种或几种检测或鉴定外源基因表达产物的方法,然后,在每一次分离纯化后检测表达产物存在哪一个级分中。
(1)用硫酸铵或酒精分级沉淀,可根据蛋白质的溶解度的差别进行分离。
(2)SDS-PAGE、凝胶过滤、超离心,以及超滤可对分子量不同的蛋白质进行分离。
(3)对带......

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