案例分析题

探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。

培养放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3～4d。一般每隔（）小时统计一次，选取（）时的记录作为结果，这样可以防止（）。

填空题涂布，按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布（）个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布（）个平板。

填空题制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL，转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰（）cm处。

填空题倒平板，分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在（）操作。

填空题若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用（）的方法进行计数，以时间为横坐标，以（）为纵坐标，绘制生长曲线。

填空题转为固体培养时，常采用（）的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

填空题培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量（）的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量（）。

填空题“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的（），实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是（）。

填空题培养基中加入化合物A的目的是筛选（），这种培养基属于（）培养基。

填空题若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过（）处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

填空题培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是（）。

填空题通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的（）。

填空题若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的（）。

填空题在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行（）（消毒、灭菌）；操作者的双手需进行清洗和（）（消毒、灭菌）；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能（）。

填空题在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑（）、（）和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、（）、（）等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

填空题分离纯化微生物最常使用的接种方法是（）和（）。