下面哪些软件可以用于引物设计？（）

多项选择题引物设计除了要考虑退火温度外，还应该考虑哪些因素？（）

A.发夹结构
B.二聚体情况
C.错配情况
D.成本

多项选择题引物设计的基本原则有哪些？（）

A.引物与模板的序列要紧密互补
B.引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构
C.设计引物的序列应位于高度保守区
D.引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应

多项选择题使用不合适的PCR引物容易导致实验失败，会有哪些表现？（）

A.出现杂带
B.无法扩增出条带
C.条带很弱
D.形成引物二聚体

单项选择题下列哪种软件不能用于同源性比较？（）

A.Primer premier 5.0
B.OMIGA
C.DNAMAN
D.Clustal X

单项选择题下列哪种情况不会影响引物的特异性？（）

A.3’端出现连续碱基
B.引物过短
C.4种碱基均匀分布
D.模板区域相似性高