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问答题

你从一种植物中制备得到一种具有潜在药用价值的生物分子,你需要对它进行鉴定与进一步的研究:(1)请设计两种不同的实验方案证明该生物分子是蛋白质;(2)在已经证明该生物分子是蛋白质的前提下,你用SDS-PAGE方法测得其相对分子质量为45000,用凝胶过滤法测得相对分子质量为90000,请解释原因;(3)为了今后能更方便地对其进行纯化,你计划利用大肠杆菌表达该蛋白质,并往其末端连接6个His残基,请给出这样做的理由。

【参考答案】

正确答案:(1)第一种方法:考马斯亮蓝法。在加有该生物分子的试管中加入考马斯亮蓝溶液,如果考马斯亮蓝溶液由红色变为青色,则证明该生物分子为蛋白质。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质一色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。 第二种方法:双缩脲法...

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