问答题
简答题 TFIILA是5SrRNA基因表达所需的转录因子。这个蛋白质含有9个锌指结构域,与5SrRNA基因内的一段序列和5SrRNA本身结合。(1)如何定位TFIIIA蛋白的DNA结合位点?(2)什么样的突变体可以确证锌指是DNA结合所需的?
【参考答案】
(1)分离一个带有5S基因的限制性片段。将两个5′端用多核苷酸酶带上标记,将其中一个标记的末端用限制性内切核酸酶切割。用纯的TFIIIA结合于DNA上,然后用DnaseI处理,在胶上分析切割产物。蛋白质结合的位置就是DNA上没有被消化的区域。记住要有一个不加蛋白质的对照,并且要滴定Dna......
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