原理:首先用DNA酶在双链DNA探针分子的一条链上制造一些缺口,缺口处会形成3’-羟基末端,这时再在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下将核苷酸残基加在3’-OH上,同时根据该酶的5’→3’核酸外切酶活性,此酶将缺口5’侧核苷酸依次切除。其结果是在缺口平移。若用高强度的放射性核苷酸([α-32P]dATP),即得到被标记的DNA探针。 酶:DNA聚合酶Ⅰ的核酸外切酶活性,核酸外切酶水解核苷酸的活性。
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