PCR反应不是无穷的进行,到了PCR后期,当产物达0.3~1pmol/L时,由于产物的堆积,使原来以指数增长的速率变成平坦的曲线。 形成原因:由于引物和dNTP的减少,Taq酶失活;或由于底物过剩、非特异性产物的竞争、变性时解链不完全、退火时产物单链自己缔合、最终产物的阻化作用。
问答题PCR反应一般分为几个步骤?各步骤有什么特点?
问答题PCR反应中加入的二价阳离子有什么功能?常用的是什么离子?
问答题PCR反应中对于加入的dNTP有什么要求?
问答题PCR中使用的DNA聚合酶有哪几种,各具有哪些特点?
问答题引物设计的基本原则有哪些?