问答题
简答题
在做多肽药物时遇到下列问题:
1)基线不稳定波动大,流动相A:1%TFA水溶液B:1%TFA乙腈溶液检测波长210nm流速1.0ml/ml什么原因?怎么解决?TFA有什么作用?流动相中不加TFA见不到主峰,基线良好。
2)做完肽类样品时怎么冲洗C18比较好;
3)药典上介绍测定分子量大于2000的样品,选择柱子填料的孔径为30nm,30nm与10nm对结果有什么区别?
【参考答案】
应该是起“离子对”的作用吧。在做多肽类样品的时候,300A孔径的填料相对100A孔径肯定要选择性好点,也就是分离度相对比较好点。流动相加入TFA,在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中,使用三氟乙酸(TFA)作为离子对试剂是常见的手段。流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极......
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