简答题

下面是荧光分析法定量检测维生素B2的试验步骤，其中有3处错误，请指出来并解释原因。
1、系列标准溶液的制备 
取维生素B2标准溶液（10.0µg/mL） 0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分别置于25mL的容量瓶中，各加入去离子水稀释至刻度，摇匀。得浓度依次为0.20µg/mL、0.40µg/mL、0.60µg/mL、0.80µg/mL、1.00µg/mL的一系列维生素B2标准溶液。待测。 
2、激发光谱和荧光发射光谱的绘制 
设置λ_em＝540nm为发射波长，在500~1000nm范围内扫描，记录荧光发射强度和激发波长的关系曲线，便得到激发光谱。从激发光谱图上可找出其最大激发波长λ_ex。 
从得到的激发光谱中找出最大激发波长，在此激发波长下，在250-500nm范围内扫描，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱。从荧光发射光谱上找出其最大荧光发射波长λ_em。 
3、标准溶液及样品的荧光测定 
固定任意一个激发波长和荧光发射波长。测量上述系列标准维生素B2溶液的荧光发射强度。数据记录于表中。以溶液的荧光发射强度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，制作标准曲线。  
在同样条件下测定未知溶液的荧光强度，并由标准曲线确定未知试样中维生素B2的浓度，计算待测样品溶液中的维生素B2的含量。